產(chǎn)品介紹:

雙螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒為檢測(cè)基因的表達(dá)量提供有效的手段，在DLR檢測(cè)中，螢火蟲螢光素酶（Firefly luciferase）和海腎螢光素酶（Renilla luciferase）的活性可在單個(gè)樣品中依次檢測(cè)。 先以螢光素（Luciferin）為底物來(lái)檢測(cè)螢火蟲螢光素酶的活性，然后加入抑制螢火蟲螢光素酶催化的物質(zhì)，同時(shí)加入腔腸素（Coelenterazine）檢測(cè)海腎螢光素酶的活性，實(shí)現(xiàn)雙螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)。通過(guò)螢光素酶和其底物這一生物發(fā)光體系，可以非常靈敏、高效地檢測(cè)基因的表達(dá)。通常把感興趣基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控元件或5'啟動(dòng)子區(qū)克隆在Luciferase的上游，或把3'- UTR區(qū)克隆在Luciferase的下游，構(gòu)建成報(bào)告基因（Reporter gene）質(zhì)粒，然后轉(zhuǎn)染細(xì)胞，用適當(dāng)藥物等處理細(xì)胞后裂解細(xì)胞，通過(guò)檢測(cè)螢光素酶活性的高低來(lái)判斷藥物處理等對(duì)目的基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用。海腎螢光素酶更多地 被用作檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率的內(nèi)參，以消除細(xì)胞數(shù)量和轉(zhuǎn)染效率的差異。

螢火蟲螢光素酶是一種分子量約為61kDa的蛋白，在ATP、鎂離子和氧氣存在的條件下，可以催化螢光素生成氧化螢光素（Oxyluciferin），在螢光素被氧化的過(guò)程中，會(huì)產(chǎn)生光信號(hào)。海腎螢光素酶是一種分子量約為36kDa的蛋白，在氧氣存在的條件下，可以催化腔腸素氧化成腸酰胺（Coelenteramide），在腔腸素氧化的過(guò)程中也會(huì)產(chǎn)生光信號(hào)。本試劑盒的光信號(hào)可以通過(guò)化學(xué)發(fā)光儀、酶標(biāo)儀或液閃測(cè)定儀進(jìn)行測(cè)定。該試劑盒具有檢測(cè)迅速、靈敏度高、檢測(cè)范圍廣，無(wú)細(xì)胞內(nèi)源活性干擾等特點(diǎn)。